王元丰出身官宦世家，不爱钱财名利、不谙男女风月，却对解谜破案情有独钟。王元丰无意中救了被封印的狐仙小翠。小翠为报恩，嫁给他为妻。王元丰不开窍，不近女色，故两人同房不同床。小翠古灵精怪，常与元丰胡闹，让王母头疼不已。不料小翠的恶作剧，却阴差阳错帮助王家躲过王给谏的陷害，并且整治了贪官。王元丰因此得到百姓拥戴，当上县令。他为官正直清廉，在小翠的帮助下，破了很多奇案，百姓们称之为“大仙衙门”。好景不长，小翠因为时限已到，终究人狐殊途，离开元丰。深爱小翠的元丰失落病倒，小翠不忍，施法让元丰忘了自己，爱上钟氏女。一天，元丰偶然打开珍藏的画像，才想起从前小翠的样子，潸然泪下。

家境丰厚，生性单纯，醉心破案与研究动物如何妖化，平日不修边幅，但是为了破案不惜一掷千金。无意救出小翠之后，获得了小翠的誓死追随，二人携手惹了不少麻烦， 也破了不少案件。在破案过程中，王元丰逐渐成长，遭到青梅竹马的白锦绣的背叛，收获了冼风华与艾丫的友情。

单纯善良的小狐妖，曾与狸猫公子一同修行，被狸猫公子利用来渡劫，元气大伤，被封印于县衙后院大仙楼。后被王元丰救出，一心想要报恩，对王元丰从满心依恋，到一往情深，中途曾遭白锦绣算计，但是想方设法嫁给了王元丰。正当她以为一切走上坦途时，狸猫公子下一个应劫期至，又打起了她的主意。

衙门捕头，与王元丰情同手足。本是岭南捉妖冼氏后人，因父母蒙冤而死，隐姓埋名流落民间，平时韬光养晦，装傻扮懵，但是在危急时刻会化身“糯米侠”主持正义。平日与艾丫针尖对麦芒，日久生情之后，却因为身受通缉拒绝了艾丫， 但是与同样缺乏身份认同感的小翠同命相怜。

雄哥之女，衙门女捕快，在生活中刁蛮可爱、古灵精怪，查起案来神勇机智、武功高强。艾丫既看不上痴迷查案不解风情的王元丰，也看不上装傻扮懵表面上窝窝囊囊的冼风华，神秘的蒙面人“糯米侠”才是艾丫心目中的盖世英雄，直到有一天她发现了“糯米侠”的真面目。

王元丰之母，王太常之妻。因目睹丈夫为维护正义，含冤受屈，化妖而去，变得无赖市侩，坚信金钱万能，可通鬼神，她没有想过丈夫还会不会回来，除了赚钱，她唯一在乎的就是独子王元丰。她会为雄哥不经意间的英雄救美而感动，内心柔肠转了千百次，表面上却不动声色，等着他先开口示意。

貌美倔强，年少时曾与王元丰相识，后流落京城。只因为母报仇，走投无路之下与狸猫公子交易，用一半灵魂换来强大的能力，从此半人半妖，受狸猫公子驱使。

《大仙衙门》中所谓的“妖怪”，都是由人演变而来。若人心一旦有了贪婪、嫉妒、仇恨等邪恶欲念，就会异化为人面兽心的“妖怪”。该剧主打“人心生恶，兽化为妖”的概念，并非把它当作题材上的噱头，也不是借古代传奇戏说当世百态，根本目的是导人向善。（腾讯娱乐评）